使用說明書

試劑盒采用雙一步夾心法酶聯吸附試驗（ELISA）。往預先包被白蛋白（ALB）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

本試劑盒采用雙夾心法酶聯吸附試驗（ELISA）。往預先包被捕獲的包被微孔中，依次加入標本、品、HRP標記的檢測，經過溫育并洗滌。

樣品收集、處理及保存

2.  ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

4.  組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

1. 酶標儀（450nm）

3. 37℃恒溫箱

試劑盒組成：自備物品1. 酶標儀（450nm）2. 加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱

豚鼠細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4(CTLA4)ELISA試劑盒

操作注意事項

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

試劑的

洗板

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

5.  棄去，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

 繪制曲線：在Excel工作表中，以品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

ELISA （Enzyme-Linkedimmunosorbent assay）的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。這一的基本原理是：①使抗原或結合到某種固相載體表面，并保持其活性。②使抗原或與某種酶連接成酶標抗原或，這種酶標抗原或既保留其活性，又保留酶的活力。在測定時，把待測樣本（測定其中的或抗原）和酶標抗原或按不同的步驟與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復合物與其他分開結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的量成一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變為有色產物，產物的量與標本中受檢的量直接相關，所以可根據顏色反應的深淺定性或定量分析。由于酶的催化速率很高，所以可地放大反應效果，從而使測定達到很高的度。

試劑盒性能

2.  靈敏度檢測濃度小于1.0 mg/mL。

4.  重復性：板內、板間變異系數均小于15%。

6.  有效期：6個月

免責聲明

2.   嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

原創作者：上海篤瑪生物科技有限公司