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人CD63/四旋蛋白30(TSPAN30/CD63)ELISA試劑盒
計算:以物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出曲線,根據樣品的OD值由曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用物的濃度與OD值計算出曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢劑盒、ELISA Kit、酶聯試劑盒、酶聯吸附測定試劑盒、酶聯分析試劑盒、酶劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢劑盒、酶聯吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,全 科研工作者的認可及推崇,在歐美及很大的推廣,尤其是國內生化域的長足發展。Elisa生物試驗是一種性高,特強,重復性好的實驗診斷。由于其試劑、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在學檢驗的各域中。ELISA檢劑盒適用于體外定性檢測人或中的抗人類(HEV) IgM ELISA檢測。
人CD63/四旋蛋白30(TSPAN30/CD63)ELISA試劑盒
ELISA檢劑盒應用定性夾心檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經 次孵育后,酶結合物就會與 次孵育結合上的HEV IgM相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化,加入溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。
用途:
ELISA的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或仍保持其學活性,酶標記的抗原或既保留其學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復合物與中的其他分開。再加入酶標記的抗原或,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應的結果,使測定達到很高的度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。
然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的才能充分發揮其學的優點。
產品特點:
一、、靈敏、特異的;二、的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相載體;四、適用、、組織勻漿液、細胞上清液、等等多種標本類型;五、節省實驗經費。elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出數據為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為29.8mg/L,則認為回收率為99%。
自從Engvall和Perlman(1971)報道建立酶聯吸附試驗(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來,由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優點,使其迅速的發展和廣泛應用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實際中應用的步伐,但隨著的不斷改進、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程制備包被抗原,采用針對某一抗原表位的單克隆進行ELISA試驗,都大大了ELISA的特,加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用,使ELISA更為簡便實用和化,從而使其成為廣泛應用的檢測。如ELISA已被廣泛應用于多種和等的診斷。在動物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的。
ELISA (Enzyme-Linkedimmunosorbent assay)的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。這一的基本原理是:①使抗原或結合到某種固相載體表面,并保持其活性。②使抗原或與某種酶連接成酶標抗原或,這種酶標抗原或既保留其活性,又保留酶的活力。在測定時,把待測樣本(測定其中的或抗原)和酶標抗原或按不同的步驟與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復合物與其他分開結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢的量直接相關,所以可根據顏色反應的深淺定性或定量分析。由于酶的催化速率很高,所以可地放大反應效果,從而使測定達到很高的度。
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