試劑盒性能

1. 特高：由于是抗原的特結合，因此試驗的特很高，能夠排除其他的。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗的靈敏度大大，能夠檢測出微量的抗原或。

3. 操作簡便：ELISA試驗操作相對簡單，容易，適合于大規模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。

樣品收集、處理及保存

1. ：使用不含熱原和內的試管，操作中避免任何細胞，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。

2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 點ELISA：與常規的微量板ELISA比較，Dot-ELISA具有簡便、節省抗原等優點，而且結果可長期保存；但其也有不足，主要是在結果判定上比較主觀，特不夠高等。該的主要操作程序為：⑴載體膜的預處理及抗原包被　取纖維素膜用蒸餾水浸泡后，稍加干燥進行壓圈。將陰性、陽性抗原及被檢測抗原適度稀釋后加入圈中，置37℃使纖維素膜干燥。每張7cm×2.3cm的膜一般可點加40－53個樣品，每個壓圈可加抗原液1－20μl。⑵ 封閉　將纖維素膜置于封閉液中，37℃感作15－30分鐘。封閉液多采用含有正常動物、pH7.2或pH7.4的PBS。⑶ 加被檢　可直接在抗原圈上加，也可剪下抗原圈、置于微量板孔中，再加入一定量適度稀釋的待檢，37℃反應一定時間，用洗滌液洗三次，每次1－3分鐘。洗滌液一般為一定濃度的PBS-Tween溶液。⑷ 加酶標，37℃反應一定時間后，用洗滌液洗三次。⑸顯色　加入新鮮配制的底物液，37℃反應一定時間后，去掉底物液，加蒸餾水洗滌終止反應。⑹ 結果判定　以陽性、陰險作為對照，膜片出現深棕紅色點者為陽性反應，否則為陰性反應。

實驗原理

      試劑盒采用雙一步夾心法酶聯吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關指標的的包被微孔中，依次加入標本、品、HRP標記的檢測，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

 人N－－D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體1(GRIN1)ELISA試劑盒

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。

2)封閉:孔內加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素)，非特蛋

白質結合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或的樣本。

4)洗滌:去除未結合的。

5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標記檢測。

6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產生顏色變化。

8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數:使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或的濃度成正比。

操作注意事項：1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正�，F象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。3. 濃度為 0 的品可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋 5 倍，終結果乘以5才是樣本終濃度。4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作.5. 所有組分使用充分搖勻。6. 若中英文說明書有誤，請以中文說明書為準。7. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。8. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

標本的采集及保存

1.：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

2.：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

3.細胞物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 

結果分析

根據試劑盒提供的品濃度及對應的OD值，利用品繪制的曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數據處理，通過計算待測樣品的濃度。

免責聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。

嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

試劑盒組成：自備物品1. 酶標儀（450nm）2. 加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱

原創作者：上海篤瑪生物科技有限公司