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推薦:牛轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒

牛轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒雙夾心ELISA:此法與雙夾心ELISA的主要區別在于:它是采用酶標抗檢查多種大分子抗原,它不僅不必標記每一種,還可試驗的性。此法的基本程序為:① 加(Ab-1)包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干② 加待檢抗原(Ag) → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干③ 加用非同種動物生產的特(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干④ 加入酶標抗Ab-2(AB-3)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正,F象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為 0 的品可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋 5 倍,終結果乘以5才是樣本終濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有組分使用充分搖勻。
6. 若中英文說明書有誤,請以中文說明書為準。
7. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
8. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟 1.從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。 2. 設置品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;品孔各加不同濃度的品 50μL; 3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL; 4. 隨后品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測 50μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 5. 棄去,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗 板 5 次(也可用洗板機洗板)。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入終止液 50μL,15min 內,在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。 結果判斷 繪制曲線:在Excel工作表中,以品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
免責聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或生物體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔, 本公司概不負責。 嚴格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
牛轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒自從Engvall和Perlman(1971)報道建立酶聯吸附試驗(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來,由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優點,使其迅速的發展和廣泛應用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實際中應用的步伐,但隨著的不斷改進、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程制備包被抗原,采用針對某一抗原表位的單克隆進行ELISA試驗,都大大了ELISA的特,加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用,使ELISA更為簡便實用和化,從而使其成為廣泛應用的檢測。如ELISA已被廣泛應用于多種和等的診斷。在動物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的。
原創作者:上海篤瑪生物科技有限公司