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新消息:兔金屬硫蛋白1E (MT1E) ELISA 試劑盒@2023已更新推薦
兔金屬硫蛋白1E (MT1E) ELISA 試劑盒
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯吸附試驗(ELISA)。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
實驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
試劑盒組成
名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
標準品 | 0.5mL | 0.5mL | 按說明書進行稀釋 |
標準品稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進行稀釋 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進行稀釋 |
檢測抗體-HRP | 6mL | 3mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 20mL | 20mL | 按說明書進行稀釋 |
底物 A | 6mL | 3mL | 無 |
底物 B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
自封袋 | 1 個 | 1 個 | 無 |
操作步驟
兔金屬硫蛋白1E (MT1E) ELISA 試劑盒
結果分析
1. 每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設置復孔,則應取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標,標準品的濃度為縱坐標,繪出標準曲線。
2. 推薦使用業的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據樣品OD值,由標準曲線查出相應的濃度,乘以稀釋倍數;亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
3. 若樣品OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數。
注意事項
1. 試劑盒的質量:選擇正規廠家生產的試劑盒,確保試劑盒的質量和穩定性。
2. 嚴格控制實驗條件:實驗過程中要嚴格控制溫度、pH值、離子強度等條件,以實驗結果的準確性。
3. 避免交叉污染:實驗過程中要避免交叉污染,確保每個步驟使用的試劑和材料都是清潔無污染的。
4. 標準化操作:實驗操作要標準化,嚴格按照試劑盒說明書進行操作,避免人為誤差對實驗結果的影響。
5. 定期校準:定期對實驗儀器進行校準,確保儀器的準確性和穩定性。
6. 保存好實驗數據:實驗過程中要保存好實驗數據,以便后續分析和處理。
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原創作者:上海篤瑪生物科技有限公司