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查找:兔乙醇脫氫酶1(ADH1) ELISA 試劑盒 @2023已更新廠家價格
兔乙醇脫氫酶1(ADH1) ELISA 試劑盒
實驗原理
1. 抗原抗體反應
ELISA試劑盒中的抗原或抗體被固定在固相載體上,當加入待測樣本時,樣本中的抗原或抗體與固相載體上的抗原或抗體發生反應,形成抗原抗體復合物。
2. 酶標記物的結合
將酶標記物與特異性抗體或抗原結合,形成酶標記抗體或抗原。酶標記物在反應中起到催化作用,加速反應進程,提高檢測靈敏度。
3. 酶促反應
在酶標記物與抗原抗體復合物結合后,加入底物溶液,底物在酶的催化下發生氧化還原反應,產生顏色變化。顏色深淺與待測樣本中的抗原或抗體濃度成正比。
4. 吸光度檢測
將反應體系中的吸光度進行測量,通過比較標準品溶液與待測樣本溶液的吸光度值,即可計算出待測樣本中的抗原或抗體濃度。
實驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
試劑盒組成
名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
標準品 | 0.5mL | 0.5mL | 按說明書進行稀釋 |
標準品稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進行稀釋 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進行稀釋 |
檢測抗體-HRP | 6mL | 3mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 20mL | 20mL | 按說明書進行稀釋 |
底物 A | 6mL | 3mL | 無 |
底物 B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
自封袋 | 1 個 | 1 個 | 無 |
操作步驟
1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲抗體或抗原。
2)封閉:孔內加入封閉劑(如牛血清白蛋白或羧甲基纖維素),阻止非特異性蛋白質結合。
3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或抗體的樣本。
4)洗滌:去除未結合的物質。
5)檢測抗體添加:加入對特定抗原有特異性的酶標記檢測抗體。
6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測抗體。
7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物產生顏色變化。
8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。
9)讀數:使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下),吸光度與樣本中抗原或抗體的濃度成正比。
兔乙醇脫氫酶1(ADH1) ELISA 試劑盒
結果分析
根據標準品和樣本的OD值,繪制標準曲線,從而計算出樣本中角蛋白1(KRT1)的濃度。具體分析方法可參考試劑盒說明書或相關文獻。
注意事項
1. 試劑盒的質量:選擇正規廠家生產的試劑盒,確保試劑盒的質量和穩定性。
2. 嚴格控制實驗條件:實驗過程中要嚴格控制溫度、pH值、離子強度等條件,以實驗結果的準確性。
3. 避免交叉污染:實驗過程中要避免交叉污染,確保每個步驟使用的試劑和材料都是清潔無污染的。
4. 標準化操作:實驗操作要標準化,嚴格按照試劑盒說明書進行操作,避免人為誤差對實驗結果的影響。
5. 定期校準:定期對實驗儀器進行校準,確保儀器的準確性和穩定性。
6. 保存好實驗數據:實驗過程中要保存好實驗數據,以便后續分析和處理。
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