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              技術文章

              推薦:兔基質金屬蛋白酶原10 (Pro-MMP-10) ELISA 試劑盒@2023已更新報價

              點擊次數:25 發布時間:2023/12/22 11:00:31
                                                      

              兔基質金屬蛋白酶原10 (Pro-MMP-10) ELISA 試劑盒


              實驗原理


                      1. 抗原抗體反應
              ELISA試劑盒中的抗原或抗體被固定在固相載體上,當加入待測樣本時,樣本中的抗原或抗體與固相載體上的抗原或抗體發生反應,形成抗原抗體復合物。
                      2. 酶標記物的結合
              將酶標記物與特異性抗體或抗原結合,形成酶標記抗體或抗原。酶標記物在反應中起到催化作用,加速反應進程,提高檢測靈敏度。

              3. 酶促反應
              在酶標記物與抗原抗體復合物結合后,加入底物溶液,底物在酶的催化下發生氧化還原反應,產生顏色變化。顏色深淺與待測樣本中的抗原或抗體濃度成正比。

              4. 吸光度檢測
              將反應體系中的吸光度進行測量,通過比較標準品溶液與待測樣本溶液的吸光度值,即可計算出待測樣本中的抗原或抗體濃度。

               

               

              實驗所需自備物品

              1. 酶標儀(450nm)

              2. 加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

              3. 37℃恒溫箱

               

              試劑盒組成

              名稱

              96 孔配置

              48 孔配置

              備注

              微孔酶標板

              12 孔×8 條

              12 孔×4 條

              標準品

              0.5mL

              0.5mL

              按說明書進行稀釋

              標準品稀釋液

              6mL

              3mL

              按說明書進行稀釋

              樣本稀釋液

              6mL

              3mL

              按說明書進行稀釋

              檢測抗體-HRP

              6mL

              3mL

              20×洗滌緩沖液

              20mL

              20mL

              按說明書進行稀釋

              底物 A

              6mL

              3mL

              底物 B

              6mL

              3mL

              終止液

              6mL

              3mL

              封板膜

              2 張

              2 張

              說明書

              1 份

              1 份

              自封袋

              1 個

              1 個


               操作步驟


              1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲抗體或抗原。

              2)封閉:孔內加入封閉劑(如牛血清白蛋白或羧甲基纖維素),阻止非特異性蛋白質結合。

              3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或抗體的樣本。

              4)洗滌:去除未結合的物質。

              5)檢測抗體添加:加入對特定抗原有特異性的酶標記檢測抗體。

              6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測抗體。

              7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物產生顏色變化。

              8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。

              9)讀數:使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下),吸光度與樣本中抗原或抗體的濃度成正比。

              兔基質金屬蛋白酶原10 (Pro-MMP-10) ELISA 試劑盒


              結果分析

              根據標準品和樣本的OD值,繪制標準曲線,從而計算出樣本中角蛋白1(KRT1)的濃度。具體分析方法可參考試劑盒說明書或相關文獻。

              注意事項


              注意事項:

              A 仔細閱讀說明書。

              B 檢查試劑盒標簽上的有效期。如果超過有效期,請勿使用。

              C 按說明書確定所有試劑齊全(數量、體積)。

              D 標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存。

              E 準備好所有實驗額外所需物品,(比如移液器,試管,清洗器,酶標儀)。

              F 按說明書將所用試劑平衡至室溫,根據檢測標本數量確定所需試劑的量。

              G 檢查試劑盒內每種試劑的貯存條件,所有試劑均按照試劑盒內說明書推薦的條件存儲。

              H 檢查不穩定或者變質的試劑溶液(比如沉淀或變色)。有些試劑,比如標準品稀釋液或者檢測稀釋液,可能在設計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標板之,必需充分混勻。而由于沉淀物的特性,在加入酶標板之,必需不停攪拌。

              I 充分的孵育時間和溫度。

              J 切勿使用不同生產批號的試劑取代現有試劑或混合現有試劑。

              K 在混合或溶解蛋白溶液時,避免泡沫產生。

              L 在實驗開始之,安排好實驗流程。

              M 在實驗開始之,清潔工作臺。

              N 若有問題,應與我公司或代理商的技術支持聯系

              試劑盒相關產品:

               

              兔接觸蛋白4(CNTN4) ELISA 試劑盒
              兔胰腺特異性轉錄因子1α (PTF1α) ELISA 試劑盒
              兔MAX二聚化蛋白1(mxd1) ELISA 試劑盒
              兔胰高血糖素樣肽2(GLP-2) ELISA 試劑盒 
              兔胃蛋白酶原C(PGC) ELISA 試劑盒
              兔唾液酸結合免疫球蛋白樣凝集素1(SIGLEC1) ELISA 試劑盒
              兔可溶性血纖蛋白單體復合物(sFMC) ELISA 試劑盒
              兔B-淋巴細胞趨化因子(BLC) ELISA 試劑盒 
              兔細絲蛋白Cγ(FLNC) ELISA 試劑盒
              兔腦型肌酸激酶(CKB) ELISA 試劑盒 
              兔唾液酸結合免疫球蛋白樣凝集素12(SIGLEC12) ELISA 試劑盒
               

              原創作者:上海篤瑪生物科技有限公司

              相關產品

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