故障

可能原因

解決方法

（一） 保留時間變化

1 柱溫變化

柱恒溫，必要時需配置恒溫箱

2 等度與梯度間未能充分平衡

至少用10倍柱體積的流動相平衡柱

3 緩沖液容量不夠

用>25mmol/L的緩沖液

4 柱污染

每天沖洗柱

5 柱內條件變化

穩定進樣條件，調節流動相

6 柱快達到壽命

采用保護柱

（二） 保留時間縮短

1 流速增加

檢查泵，重新設定流速

2 樣品超載

降低樣品量

3 鍵合相流失

流動相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向

4 流動相組成變化

防止流動相蒸發或沉淀

5 溫度增加

柱恒溫

（三） 保留時間延長

1 流速下降

管路泄漏，更換泵密封圈，排除泵內氣泡

2 硅膠柱上活性點變化

用流動相改性劑，如加三乙胺，或采用堿至鈍化柱

3 鍵合相流失

同前（二）3

4 流動相組成變化

同前（二）4

5 溫度降低

同前（二）5

（四） 出現肩峰或分叉

1 樣品體積過大

用流動相配樣，總的樣品體積小于峰的15%

2 樣品溶劑過強

采用較弱的樣品溶劑

3 柱塌陷或形成短路通道

更換色譜柱，采用較弱腐蝕性條件

4 柱內燒結不銹鋼失效

更換燒結不銹鋼，加在線過濾器，過濾樣品

5 進樣器損壞

更換進樣器轉子

（五） 鬼峰

1.進樣閥殘余峰

每次用后用強溶劑清洗閥，改進閥和樣品的清洗

2.樣品中未知物

處理樣品

3.柱未平衡

重新平衡柱，用流動相作樣品溶劑 （尤其是離子對色譜）

4.三氟乙酸（TFA）氧化（肽譜）

每天新配，用抗氧化劑

5.水污染（反相）

通過變化平衡時間檢查水質量，用HPLC級的水

（六） 基線噪聲

1 氣泡（尖銳峰）

流動相脫氣，加柱后背壓

2 污染（隨機噪聲）

清洗柱，凈化樣品，用HPLC級試劑

3 檢測器燈連續噪聲

更換氘燈

4 電干擾（偶然噪聲）

采用穩壓電源，檢查干擾的來源（如水浴等）

5 檢測器中有氣泡

流動相脫氣，加柱后背壓

（七） 峰拖尾

1 柱超載

降低樣品量，增加柱直徑采用較高容量的固定相

2 峰干擾

清潔樣品,調整流動相

3 硅羥基作用

加三乙胺，用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度，降低流動相PH值，鈍化樣品

4 同前（四）4

同前（四）4

5 同前（四）3

同前（四）3

6 死體積或柱外體積過大

連接點降至，對所有連接點作合適調整，盡可能采用細內徑的連接管

7 柱效下降

用較低腐蝕條件，更換柱，采用保護柱

（八） 峰展寬

1 進樣體積過大

同（四）1

2 在進樣閥中造成峰擴展

進樣前后排出氣泡以降低擴散

3 數據系統采樣速率太慢

設定速率應使每峰大于10點

4 檢測器時間常數過大

設定時間常數為感興趣峰半寬的10%

5 流動相粘度過高

增加柱溫，采用低粘度流動相

6 檢測池體積過大

用小體積池，卸下熱交換器

7 保留時間過長

等度洗脫時增加溶劑含量也可用梯度洗脫

8 柱外體積過大

將連接管徑和連接管長度降至*小

9 樣品過載

進小濃度小體積樣品