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HPLC的操作和管理的五個心得體會(下)
1、經常用強溶劑沖洗柱子,將柱內強保留組分及時洗脫出。反相柱用異丙醇--二氯甲烷(1:1)沖洗,正相(硅膠柱)用純甲醇或異丙醇沖洗,時間均不少于1h。
2、做完試驗,及時用適當溶劑沖洗柱子和進樣閥,尤其是對過夜的柱子和進樣閥,一定要用足量的水徹底洗凈其中的鹽類、緩沖液,再用甲醇或乙腈沖洗,并保存在乙腈中。正相柱保存在非極性有機溶劑(如己烷)中。
3、以硅膠為基質的柱子,如C-18、C-8等,要控制好流動相的pH值,一般不要低于2.5,不高于7.0。
4、盡量用流動相溶解樣品,一是避免出現拖尾峰、怪峰,二是避免試樣在系統中由于溶解度降低而析出。
5、對于阻塞或受傷嚴重的柱子,必要時,可卸下不銹鋼濾板,超聲洗去濾板阻塞物,對塌陷污染的柱床進行清除、填充、修補工作,此舉可使柱效恢復到一定程度(80%),有繼續使用的價值。
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