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              技術文章

              選擇凝膠的方法

              點擊次數:448 發布時間:2011/4/15 16:16:54

              上海勁馬生物科技有限公司專業經營生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品,致力于向國內生命科學研究人員提供一流的產品和服務。

              1.測定------分子量、PI
                      當目標蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚時,可用PAGE電泳方法或層析方法加以測定。分離范圍廣闊的Superose HR預裝柱很適合測定未知蛋白的分子量。用少量離子交換介質在多個含不同PH緩沖液的試管中,可簡易地測出PI,并選擇純化用緩沖液的*佳PH。
                    2.選擇------層析方法

                    若對目標蛋白的特性或樣品成分不太了解,可嘗試幾種不同的純化方法:
              一] 使用*通用的凝膠過濾方法,選擇分離范圍廣闊的介質如Superose、Sephacryl HR依據分子量將樣品分成不同組份。
              二] 用含專一配體或抗體的親和層析介質結合目標蛋白。亦可用各種活化偶聯介質偶聯目標蛋白的底物、受體等自制親和介質,再用以結合目標蛋白。一步即可得到高純度樣品。
              三] 體積大的樣品,往往使用離子交換層析加以濃縮及粗純化。高鹽洗脫的樣品,可再用疏水層析純化。疏水層析利用高鹽吸附、低鹽洗脫的原理,洗脫樣品又可直接上離子交換等吸附性層析。兩種方法常被交替使用于純化流程中。
                     3.純化------大量粗品
              處理大量原液時,為避免堵塞柱子,一般使用sepharose big beads、sepharoseXL、sepharose fast flow等大顆粒離子交換介質。擴張柱床吸附技術利用多種STREAMLINE介質,直接從含破碎細胞或組織萃取物的發酵液中俘獲蛋白。將離心、超濾、初純化結合為一。提高回收率,縮短純化周期。

                       上海勁馬生物科技主營產品:ELISA試劑盒,檢測試劑盒,分子生物學試劑盒,生物診斷試劑盒,金標檢測試劑盒,放免試劑盒,生物試劑,胎牛血清,各類動物血清,各種抗體,實驗儀器。

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              原創作者:杭州旺森科技有限公司

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