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技術文章
豚鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA試劑盒說明書
點擊次數:540 發布時間:2011/3/30 14:00:50
本公司專業供應elisa試劑盒,品質保證,價格優惠,可免費提供代測服務,歡迎來電咨詢!本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷。;豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)定量檢測試劑盒(elisa)使用說明書;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;; 【豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)elisa試劑盒試劑盒名稱】豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)定量檢測試劑盒(elisa)【豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)elisa試劑盒試劑盒用途】定量檢測血清、血漿及相關液體!倦嗍笸砥谔腔K末產物(ages)elisa試劑盒檢測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(elisa)。將標準品、待測樣本加入到預先包被豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)單克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物a、b,底物(tmb)在辣根過氧化物酶(hrp)催化下轉化為藍色產物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)濃度呈正相關,450nm波長下測定od值,根據標準品和樣品的od值,計算樣本中豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)含量!倦嗍笸砥谔腔K末產物(ages)elisa試劑盒試劑盒組成】 1 酶標包被板 12孔×8條 7 顯色劑a液 6ml 2 標準品 0.3ml×6管 8 顯色劑b液 6ml 3 20倍濃縮洗滌液 25ml 9 終止液 6ml 4 樣本稀釋液 6ml 10 說明書 1份 5 特殊稀釋液 6ml 11 封板膜 2張 6 酶標試劑 6ml 12 密封袋 1個 【豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)elisa試劑盒需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱2、標準規格酶標儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)elisa試劑盒操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μl;待測樣本孔中先加入待測樣本10μl,再加樣本稀釋液40μl(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μl,空白對照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑a 液50μl,再加入顯色劑b液 50μl,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。11、測定:以空白孔調零,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(od值)。12、計算:根據標準品的濃度及對應的od值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣本的od值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。*終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數!倦嗍笸砥谔腔K末產物(ages)elisa試劑盒樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉(nan3),因為疊氮鈉(nan3)是辣根過氧化物酶(hrp)的抑制劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒!倦嗍笸砥谔腔K末產物(ages)elisa試劑盒注意事項】1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為6.25-200ng/l,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(6.25-200ng/l范圍內),乘以總稀釋倍數即為樣本*終濃度。6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。8、試劑盒保質期內使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物b對光敏感,避免長時間暴露于光下。;【豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)elisa試劑盒操作程序總結】;準備試劑,樣品和標準品 ;;加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘;洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘;洗板4次,加入顯色液a、b,37℃顯色15分鐘;加入終止液;15分鐘之內讀od值;計算;【豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)elisa試劑盒檢測范圍】請來電咨詢【豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)elisa試劑盒規格】96人份/盒 48人份/盒【豚鼠晚期糖基化終末產物(ages)elisa試劑盒貯藏】2-8℃,避光防潮保存!倦嗍笸砥谔腔K末產物(ages)elisa試劑盒有效期】6個月本公司為國內權威試劑盒供應商,
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