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技術文章
細胞免疫染色復染
點擊次數:601 發布時間:2011/3/24 18:16:08
復染常有助于在細胞免疫染色中鑒別不同的細胞類型,或者亞細胞結構。這對組織切片來說是基本步驟,并可鑒定細胞的類型。也可用于其他染色反應。復染不能使用熒光染料,因其復染后可產生自發熒光。為了選擇一種適宜的復染方法,首先應檢測細胞染色試劑是否在乙醇中可溶。
1.不溶于乙醇的方法
(1)用水輕輕洗滌標本片;
(2)加數滴Harris蘇木精(商品化試劑)于標本中,孵育約5min。染色時間的長短決定染色的強度;
(3)用水輕輕洗滌;
(4)用0.5%冰乙酸/99.5%乙醇處理標本片大約10rain;
(5)用水輕輕洗滌;
(6)用DPX封片。
2.溶于乙醇的方法
(1)用水輕輕洗滌標本片;
(2)加數滴Mayer蘇木精(商品化試劑)至標本片,孵育大約5min,染色時間的長短決定染色的強度;
(3)用水輕輕洗滌;
(4)用30mm01/L氫氧化銨重復處理標本片
(5)用水輕輕洗滌;
(6)用Gelvat01或MOWi。1封片。
復染 | 推薦用法 | 需準備試齊 | 優 點 | 缺 點 |
蘇木精 | 可用于黑色或棕色染料;用于核或細胞質抗原染色 | 可購買 | 可保存的信息量大;核大 | 染色很暗,不適合弱抗原信號的顯示 |
甲基綠 | 可用黑色或棕色染色,用于核抗原染色 | 貯存液二1%甲基綠溶于100mmol/L 酸鈉(pH5.5);工作液為0.1% | 染色淺,適用于弱抗原信號,胞質大 | 獲得的組織或細胞精細資料有限 |
堅固紅 | 用于藍色染色或LacZ檢測,可用于核或細胞質抗原染色 | 可購買 | | 著色很淺,獲得的組織或細胞精細資料有限 |
原創作者:杭州旺森科技有限公司