一、 儀器與試劑

1. 儀器:UV2101  PC紫外-可見分光光度計

2. 試劑:甲醇、氯化鈷、改良對二甲氨基甲醛(取對二甲氨基甲醛1g，加鹽酸34Ml, 甲醇100mL,混勻，即得)

二、 溶液制備

1. 樣品溶液制備  精密稱取提取物樣品約120mg(60%總皂甙),原料樣品2000~1600mg,置50mL容量瓶中，加甲醇約20mL, 超聲波振蕩(提取物20min,原料1h),冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，過濾，精密吸取溶液5mL,置具塞試管中,改良對二甲氨基甲醛溶液5mL,密塞，搖勻。置58±2℃水浴中加熱2h,即得樣品溶液。

2. 樣品用空白溶液制備   以甲醇代替樣品溶液，同法處理即得空白溶液。

3. 標準品溶液制備      精密稱取氯化鈷試劑約0.6g，置25mL量瓶中，加水使溶解，用水定容，搖勻即得標準品溶液。

4. 標準品用空白溶液制備   以水為空白溶液。

三．樣品處理

1 主要針對稱樣量，溶解試劑量，超聲時間。取3個平行樣品，稱樣量依次為120mg(60%總皂甙),180mg(60%總皂甙), 240mg(60%總皂甙)，置50ml容量瓶中，依次加甲醇為20ml,25ml,30ml,超聲波震蕩依次為20min,25min,30min,冷卻至室溫（目的是為了避免個人誤差和系統誤差）

2 水溶加熱時的注意事項和處理方法：在人工加熱過程中，使水溫保持在56-60度之間。每隔10分鐘左右用溫度計進行測量，若水溫超出正常范圍，應及時加水，使水溫保持在正常范圍內。

四．樣品測定

打開儀器電源，預熱20min，待儀器自檢通過后，在515nm處分別以水和樣品空白溶液作為空白，測定標準品溶液產樣品溶液吸收度。

五. 結果計算

C%=

式中:A、W分別代表樣品吸收什和稱樣量(mg)

As、Ws分別代表標準品吸收值和稱樣量(mg)

注意：

1.樣品不允許用水浸潤后加甲醇溶解

2.樣品不允許用含水甲醇溶解

3.原料樣3~4g/100mL.

4.在水溶加熱過程中，應塞緊試管瓶口，避免讓水蒸汽或水接觸溶液

5.顯色反映：水溶加熱2H后的溶液，迅速使溶液溫度降至室溫，正常情況需啊顯色后顏色為淡紅色。3個平行樣品的顏色依次加深。