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戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制說明
點擊次數:94發布時間:2017/12/8 14:14:50

更新日期:2019/11/22 9:41:55
所 在 地:中國大陸
產品型號:
優質供應
詳細內容
中文名:戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)
供應商:上海遠慕
規格:100ml,500ml
分類:固定液
保存:4℃,避光,12個月
產品用途:對細胞核、細胞漿的細微結構固定效果好,主要用于電鏡標本的固定。不適用固定核酸、多糖物質。
說明:進口原料,主要由戊二醛、磷酸鹽組成,特別適用于電鏡樣本。
適用范圍:限于科研,實驗

戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)簡介:
固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦味酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。戊二醛固定液會引起蛋白質α-螺旋結構變形,不利于過氧化物酶染色。戊二醛固定液固定速度快,滲透力差。Leagene戊二醛固定液(電鏡專用,2.5%)由戊二醛、磷酸鹽、去離子水等組成,pH7.2~7.4,該固定液對細胞核、細胞漿的細微結構固定效果好,經常用于電鏡標本的固定。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用) 操作流程 :
1、根據實驗具體要求操作。
2、取新鮮標本,立即入戊二醛固定液4℃固定1~4h。
3、稍大標本應適當延長固定時間。
4、送檢或4℃保存。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制說明:
1.離心收集細胞,PBS漂洗兩遍,雙醛固定(2%多聚甲醛+2.5%戊二醛。雙醛固定對免疫電鏡更加適合。)30min,PBS漂洗兩遍,1%鋨酸固定1h,PBS清洗3遍,用小的樣品勺取出一點標本,置包埋板或小的離心管中,然后常規梯度脫水,浸透,包埋。
2.把細胞離心取沉淀細胞,,然后拿PBS液漂洗兩遍后,倒去上清,直接加2.5%戊二醛固定后,電鏡室脫水、包埋、切片后置透射電鏡下觀察。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制說明 注意事項:
1、 戊二醛固定液有一定腐蝕性,請在通風較好的環境下小心操作, 避免吸入。
2、 組織取材的厚度不同,固定時間也不同。常規活檢組織比較適合的厚度為2~4mm,一般不超過6mm。對組織恰當的選材有利于固定液的滲透。
3、 固定液的容量應足夠,一般固定液與組織塊的體積比率應大于10:1。如果容積不夠大,可以在固定期間更換1~3次固定液。
4、 溫度對固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但本固定液不要提高溫度。
5、 取出新鮮組織后,應及時固定。無法及時固定時,應保存于格理鹽水中及時送檢。
6、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
固定液分類:
Ⅰ類:醛類,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,,已二醛,丙二醛等。
Ⅱ類:氧化劑類,四氧化鋨(奧酸),高錳酸鉀,重鉻酸鉀等。
Ⅲ類:蛋白變性類,甲醇,乙醇,醋酸等。
Ⅳ類:其他,氯化汞,苦味酸等。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)固定液的要求:
1、揮發性小,操作溫度下有較低蒸氣壓,以免流失。
2、熱穩定性好,操作溫度下不發生分解和聚合反應,并且液體狀態,保持固定液原來的特性。
3、對試樣有一定的溶解能力,以免被測組分被帶走起不到分配作用。
4、具有良好的選擇性,即操作條件下,對沸點相近或者性質相似的不同物質有盡可能高的分離能力。
5、化學穩定性好,不與被測組分,擔體,載氣發生化學反應。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制說明固定液的選擇:
一般采取相似相溶原則:
1、分離非極性物質時,選用非極性固定液,非極性大的后出峰,小的先出峰
2、分離極性物質時,選用極性固定液,極性大的后流出,小的先流出
3、極性與非極性混合液時,選擇極性固定液,極性大的后出峰,小的先出峰
4、對于氫鍵型的物質,選擇極性或者氫鍵型固定液,不易形成氫鍵的先流出色譜柱,反之則反
5、分離復雜的難分離物質,可選用兩種或兩種以上的混合固定液。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制方法:
1.先以500ml左右的二甲酸鈉緩沖液溶解對苯醌及多聚甲醛,然后加入戊二醛,*后加入二甲酸鈉緩沖液至1000ml充分混合。
2.對苯醌與戊二醛及甲醛聯合應用,即可阻止醛基對抗原的損害,又不影響超微結構的保存,故適于多種類抗原的免疫細胞化學,尤其是免疫電鏡的研究。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)相關產品如下:
多聚甲醛-戊二醛混合固定液(4%/1%)
多聚甲醛溶液(4% PFA,RNase free)
中性福爾馬林固定液(10%,RNase free)
甲醛鈣固定液(10%)
Millonig緩沖福爾馬林(10%)
福爾馬林-乙酸鈣固定液(10%)
多聚甲醛溶液(4% PFA,電鏡專用)
酒精-福爾馬林-甘油固定液
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液
多聚甲醛溶液(6% PFA)
多聚甲醛-蔗糖溶液(5%)
戊二醛固定液(1%,電鏡專用)
多聚甲醛溶液(4% PFA)
Carnoy固定液Ⅱ
Hollande固定液
一氧化氮合酶染色液
FPA固定液
Bouin's固定液
磷酸緩沖鹽粉劑(1×PBS,含鈣鎂)細胞松弛素B儲存液(Cytochalasin B,1mg/ml)高鹽TE緩沖液(1mol/L,pH8.0)
胰蛋白酶-CaCl2溶液(0.1%)
GTBE電泳緩沖液(10×)
固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦味酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。戊二醛固定液會引起蛋白質α-螺旋結構變形,不利于過氧化物酶染色。戊二醛固定液固定速度快,滲透力差。Leagene戊二醛固定液(電鏡專用,2.5%)由戊二醛、磷酸鹽、去離子水等組成,pH7.2~7.4,該固定液對細胞核、細胞漿的細微結構固定效果好,經常用于電鏡標本的固定。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用) 操作流程 :
1、根據實驗具體要求操作。
2、取新鮮標本,立即入戊二醛固定液4℃固定1~4h。
3、稍大標本應適當延長固定時間。
4、送檢或4℃保存。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制說明:
1.離心收集細胞,PBS漂洗兩遍,雙醛固定(2%多聚甲醛+2.5%戊二醛。雙醛固定對免疫電鏡更加適合。)30min,PBS漂洗兩遍,1%鋨酸固定1h,PBS清洗3遍,用小的樣品勺取出一點標本,置包埋板或小的離心管中,然后常規梯度脫水,浸透,包埋。
2.把細胞離心取沉淀細胞,,然后拿PBS液漂洗兩遍后,倒去上清,直接加2.5%戊二醛固定后,電鏡室脫水、包埋、切片后置透射電鏡下觀察。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制說明 注意事項:
1、 戊二醛固定液有一定腐蝕性,請在通風較好的環境下小心操作, 避免吸入。
2、 組織取材的厚度不同,固定時間也不同。常規活檢組織比較適合的厚度為2~4mm,一般不超過6mm。對組織恰當的選材有利于固定液的滲透。
3、 固定液的容量應足夠,一般固定液與組織塊的體積比率應大于10:1。如果容積不夠大,可以在固定期間更換1~3次固定液。
4、 溫度對固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但本固定液不要提高溫度。
5、 取出新鮮組織后,應及時固定。無法及時固定時,應保存于格理鹽水中及時送檢。
6、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
固定液分類:
Ⅰ類:醛類,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,,已二醛,丙二醛等。
Ⅱ類:氧化劑類,四氧化鋨(奧酸),高錳酸鉀,重鉻酸鉀等。
Ⅲ類:蛋白變性類,甲醇,乙醇,醋酸等。
Ⅳ類:其他,氯化汞,苦味酸等。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)固定液的要求:
1、揮發性小,操作溫度下有較低蒸氣壓,以免流失。
2、熱穩定性好,操作溫度下不發生分解和聚合反應,并且液體狀態,保持固定液原來的特性。
3、對試樣有一定的溶解能力,以免被測組分被帶走起不到分配作用。
4、具有良好的選擇性,即操作條件下,對沸點相近或者性質相似的不同物質有盡可能高的分離能力。
5、化學穩定性好,不與被測組分,擔體,載氣發生化學反應。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制說明固定液的選擇:
一般采取相似相溶原則:
1、分離非極性物質時,選用非極性固定液,非極性大的后出峰,小的先出峰
2、分離極性物質時,選用極性固定液,極性大的后流出,小的先流出
3、極性與非極性混合液時,選擇極性固定液,極性大的后出峰,小的先出峰
4、對于氫鍵型的物質,選擇極性或者氫鍵型固定液,不易形成氫鍵的先流出色譜柱,反之則反
5、分離復雜的難分離物質,可選用兩種或兩種以上的混合固定液。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)配制方法:
1.先以500ml左右的二甲酸鈉緩沖液溶解對苯醌及多聚甲醛,然后加入戊二醛,*后加入二甲酸鈉緩沖液至1000ml充分混合。
2.對苯醌與戊二醛及甲醛聯合應用,即可阻止醛基對抗原的損害,又不影響超微結構的保存,故適于多種類抗原的免疫細胞化學,尤其是免疫電鏡的研究。
戊二醛固定液(2.5%,電鏡專用)相關產品如下:
多聚甲醛-戊二醛混合固定液(4%/1%)
多聚甲醛溶液(4% PFA,RNase free)
中性福爾馬林固定液(10%,RNase free)
甲醛鈣固定液(10%)
Millonig緩沖福爾馬林(10%)
福爾馬林-乙酸鈣固定液(10%)
多聚甲醛溶液(4% PFA,電鏡專用)
酒精-福爾馬林-甘油固定液
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液
多聚甲醛溶液(6% PFA)
多聚甲醛-蔗糖溶液(5%)
戊二醛固定液(1%,電鏡專用)
多聚甲醛溶液(4% PFA)
Carnoy固定液Ⅱ
Hollande固定液
一氧化氮合酶染色液
FPA固定液
Bouin's固定液
磷酸緩沖鹽粉劑(1×PBS,含鈣鎂)細胞松弛素B儲存液(Cytochalasin B,1mg/ml)高鹽TE緩沖液(1mol/L,pH8.0)
胰蛋白酶-CaCl2溶液(0.1%)
GTBE電泳緩沖液(10×)