企業檔案
- 會員類型：免費會員
- 工商認證： 【已認證】
- 最后認證時間：
- 法人：
- 注冊號：
- 企業類型：代理商
- 注冊資金：人民幣50萬
聯系我們
聯系人：王宇豪
熱門標簽
公司動態
遠慕新聞：核酸純化最近有哪些新亮點？
在臨床或科研實驗室中，各種各樣的樣本在等待著核酸提取，包括常規的血液和細胞，新鮮、冷凍或陳舊的組織活檢樣本，以及環境或農業應用中的土壤或植物樣本。提取是否成功，是決定下游實驗能否順利開展的關鍵。盡管核酸提取的方法已經成熟，但科學界還是有一些新亮點。
手動提取
手動提取核酸的方法主要分為兩大類：液相提取和固相提取。盡管固相提取已經成為主流，但基于酚/氯仿的液相提取方法仍被廣泛使用，也是當前研究和改進工作的主題。
2018年發表的論文《Optimization of phenol/chloroform RNA extraction》對經典的1987配方進行了改進1。它通過增加一次氯仿洗滌、幾次RNA洗滌和兩次乙醇洗滌來減少終產物中的污染物。作者的結論是逆轉錄和RT-qPCR后的閾值更低，以及低豐度轉錄本的檢測靈敏度更高。
固相提取是基于核酸和硅膠柱之間的可逆交聯，或磁珠對目標核酸的吸附。在這兩種情況下，提取過程都是在有利于結合的緩沖液中讓核酸與固相結合，然后洗掉污染物，再將分離出的核酸洗脫。磁珠法的優勢在于不使用高速離心，因為這可能打斷大分子。
自動提取
核酸提取的自動化主要是用機器人系統來取代手動處理，如緩沖液的交換、樣品管的移動和微孔板的堆疊等。自動化的優勢在于操作過程保持一致，并且研究人員有時間去從事其他工作。核酸提取的自動化系統也分為兩類：多用途的自動化平臺和專門的核酸提取系統。
許多多功能平臺的制造商已經開發出控制軟件，能夠自動化完成核酸提取試劑盒操作指南中的各個步驟。同時，這些靈活的系統還能夠將核酸提取操作與下游應用相整合。例如，Hudson Robotics的SOLO系統通過OD讀板器支持DNA的歸一化。它能夠與熱循環儀整合，完成PCR操作。此外，它還能將整個NGS文庫制備流程自動化。
專門的核酸提取設備則占用較少的空間，專為幾種試劑盒而優化。制造商不斷開發出新的試劑盒和操作，以擴展這些系統的功能。*近，Promega推出了Stabilized Saliva DNA試劑盒，可用于其Maxwell RSC系統。QIAGEN也推出了與QIAcube系統兼容的DNeasy PowerSoil Pro Kit。
特殊用途
通常，細胞采集和裂解之后會立即進行上述的純化操作，以盡量避免因降解而造成的核酸產量或質量下降。然而，FFPE（福爾馬林固定石蠟包埋）樣品和血液采集卡卻是兩個例外。
全世界的FFPE組織樣本庫代表了生物醫學研究的寶貴資源。不過，為保留樣本細節而設計的福爾馬林固定過程卻對核酸有害，而樣品脫蠟又讓核酸提取過程進一步復雜化。近年來，各大廠商分別開發出產品，旨在從FFPE樣本中高效提取出核酸。
不久前，挪威的研究人員對市場上七種FFPE核酸提取試劑盒進行了比較，并在《Plos ONE》雜志上發表了結果2。他們認為，盡管大多數的試劑盒都是基于離心柱方法，但脫蠟方法、捕獲表面和緩沖液組分存在明顯差異。他們還提供了有用的信息，可幫助研究人員選擇適合特定樣本和下游應用的*佳方案。
血液采集卡采用普通濾紙經特殊處理加工而成，用于生物分子的保存。保留在采集卡上的血斑具有很好的穩定性，可以長時間儲存，或在室溫環境下運輸，直至提取過程開始。
盡管血液采集卡已出現多年，但全球健康問題再次推動了產品研發。GenTegra公司的James Nelson博士認為，主要的推動因素是HIV和艾滋病。這家公司主要生產核酸等生物制品的室溫存儲產品。
人們往往采用定期的HIV RNA檢測來確定病毒數量，并監控艾滋病的進展。這些數據可用來評估治療方法是否成功。“每年有180萬新的艾滋病病例，而70%的患者生活在非洲，在那里冷鏈運輸是無法想象的，”Nelson博士解釋說。
“在今年的研究中，我們發現我們的血液采集卡能夠從干血斑中釋放95%的核酸材料。傳統的濾紙型卡片丟失了一半左右。這種提取產量的差異提高了HIV監控的效率，將對根除病毒產生重要的影響，”他說。
全新方法
Purigen Biosystems正在開發一種全新的方法。它利用等速電泳（ITP）的原理來分離細胞裂解液中的DNA，并將純化后的DNA濃縮成小體積。
與凝膠電泳技術不同，等速電泳是基于離子遷移率來分離和聚焦帶電分子，而非大小。在電場中，含有高遷移率離子的電解質快速遷移，并與含有低遷移率離子的尾隨電解質分離。在加入細胞裂解液后，它的DNA遷移速度介于兩者之間。經過一段時間電泳后，達到完全分離。
“等速電泳是一種從細胞中提取和回收DNA的新方法，”Purigen Biosystems的Barney Saunders博士稱。“傳統方法存在產量和純度變化、流程復雜、鹽和溶劑殘留等問題。在等速電泳中，鹽濃度低得多，并且不需要溶劑或變性劑。沒有結合、洗滌或離心。”這家公司正計劃通過早期試用項目來檢驗這項技術。
