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遠慕生物講解:細胞培養常見問題解答
點擊次數：355 發布時間：2018/8/21
培養液 pH 值變化太快
可能原因：1，CO2 張力不對。
2，培養瓶蓋擰得太緊。
3，NaHCO3 緩沖系統緩沖力不足。,
4，培養液中鹽濃度不正確
5，細菌、酵母或真菌污染
建議解決方法：1）按培養液中 NaHCO3 濃度增加或減少培養箱內CO2 濃度，2.0g/L 到 3.7g/L 濃度 NaHCO3 對應 CO2 濃度為 5％ 到 10％。
2）改用不依賴 CO2 培養液。
松開瓶蓋 1/4 圈。
3）加 HEPES 緩沖液至 10 到 25mM 終濃度。
在 CO2 培養環境中改用基于 Earle′s 鹽配制的培養
液，在大氣培養環境中培養改用 Hanks 鹽配制的培養
液。
4）丟棄培養物。
5）或用抗生素除菌。
可能原因：1，培養液出現沉淀，但pH值不變
,2，用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養基成分沉淀下來,
3，可能原因：冰凍保存培養液 用去離子水反復沖洗玻璃器皿，然后除菌。
將培養液加熱到 37℃，搖動使其溶解如沉淀仍然存在，
丟棄培養液。
培養細胞死亡
可能原因：1，培養箱內無 CO2,2，培養箱內溫度波動太大,3，細胞凍存或復蘇過程中損傷,4，培養液滲透壓不正確,5，培養液種有毒代謝產物堆積,6，檢測培養箱內 CO2
建議解決方法：1）檢查培養箱內溫度
2）取新的保存細胞種
3）檢測培養液滲透壓。注意：大多數哺乳動物細胞能耐受
4）滲透壓為 260 – 350 mOsm/kg。加入額外試劑如 HEPES或藥物都有可能影響培養液滲透壓。
5）換入新鮮培養液
