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客戶通過百川網訂購精子細胞BWW培養基
點擊次數:1314 發布時間:2018/8/2
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正常精液是一種混合物,在射精時由睪丸和附睪的分泌物及懸浮其中的精子與前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成,*終射出的混合物是一種粘稠的液體。精子分析的方法有很多,其中可通過培養進行檢測。
Leagene精子細胞BWW培養基儲存液主要由氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、硫酸鎂、酚紅等組成,不含葡萄糖、丙酮酸鈉、BSA等以及抗生素,是一種旨在用于廣譜動物和人體精子細胞獲能處理的常用營養液。
操作步驟
1、 取干凈的精液樣本室溫放置,使之充分液化。 2、 制備精子細胞(僅供參考,不是必須步驟):
1)、上泳法:取一個無菌的15ml錐底離心管,加入1ml液化的精液,在其上方輕輕加入Earle培養液,45°傾斜試管。輕輕豎立試管,取出*上層的1ml液體。加入8ml增補的Earle培養液稀釋,棄上清。加入Earle培養液0.5ml重新懸浮細胞,用于精子密度或功能的評估。
2)、非連續密度梯度法:取一個無菌的錐底離心管,加入Percoll。輕輕加入3ml 40%的Percoll于Percoll液面上,小心操作,不要打亂兩種液體的界面。輕輕加入1-2ml精液于梯度溶液上,棄上清。將管底的精子團重新懸浮于的Earle培養液中,離心,棄上清。加入1mlEarle培養液,重新懸浮。
3、 將含有精子細胞的離心管置于37℃含5%CO2、95%空氣的細胞培養箱中孵育。如無上述培養箱,可將離心管密封加蓋,置于37℃的普通培養箱內孵育。在孵育過程中,大多數活動的精子從精漿中游離到覆蓋上面的培養液內。
4、 離心精子懸液,使精子細胞密度接近于10×106/ml,將精子重懸于精子細胞BWW培養基中,并在37℃含5%CO2、95%空氣的細胞培養箱內孵育。如無上述培養箱,可將離心管密封加蓋,置于37℃的普通培養箱內孵育。在孵育過程中,將試管20°傾斜。
注意事項:
1、 注意無菌操作,盡量避免污染。
2、 如無Earle培養液和增補的Earle培養液,可用精子細胞BWW培養基代替。
3、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。