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動物血清的保存方法有哪些
點擊次數:511 發布時間:2018/11/16 12:01:39
動物血清對培養中的細胞起到某些保護作用,在內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶、血清中含有抗蛋白酶成分起到中和作用。不僅如此,血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用?梢哉f,動物血清的用途是特別的廣泛!在很多的科研實驗中都會經常使用到,我們該如何進行保存呢?
動物血清保存方法:
1,需求長時間保存的血清有必要貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超越1個月,由于血清結冰時體積會添加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留必定體積空間,否則易發作污染或玻璃瓶凍裂。
2,熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已徹底凍結的血清,加熱過程中須規矩搖晃均勻,此熱處理的意圖是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非有必要,一般不主張作此熱處理,由于熱處理會形成血清沉積物明顯增多,并且還會影響血清的質量,補體參加反響有:細胞毒效果, 滑潤肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板開釋組胺, 增強吞噬效果, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發作化學趨化和活化。
3,瓶裝血清凍結需選用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(當心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉積的發作,切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍結,這樣因溫度改動太大,簡單形成蛋白質凝聚而呈現沉積。
4,一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發現血清有懸浮物,則可將血清參加培養液內一同過濾,切勿直接過濾血清。
5,動物血清中的沉積物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結后血清中纖維蛋白形成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量,可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理, 顯微鏡下"小黑點":通過熱處理過的血清,沉積物的形成會明顯增多,有些沉積物在顯微鏡下調查象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果置疑血清質量,則應立即停止使用,替換另一批號的血清。
6,切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,一起血清中的有效成分會破會而影響血清質量。
動物血清保存方法:
1,需求長時間保存的血清有必要貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超越1個月,由于血清結冰時體積會添加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留必定體積空間,否則易發作污染或玻璃瓶凍裂。
2,熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已徹底凍結的血清,加熱過程中須規矩搖晃均勻,此熱處理的意圖是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非有必要,一般不主張作此熱處理,由于熱處理會形成血清沉積物明顯增多,并且還會影響血清的質量,補體參加反響有:細胞毒效果, 滑潤肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板開釋組胺, 增強吞噬效果, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發作化學趨化和活化。
3,瓶裝血清凍結需選用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(當心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉積的發作,切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍結,這樣因溫度改動太大,簡單形成蛋白質凝聚而呈現沉積。
4,一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發現血清有懸浮物,則可將血清參加培養液內一同過濾,切勿直接過濾血清。
5,動物血清中的沉積物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結后血清中纖維蛋白形成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量,可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理, 顯微鏡下"小黑點":通過熱處理過的血清,沉積物的形成會明顯增多,有些沉積物在顯微鏡下調查象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果置疑血清質量,則應立即停止使用,替換另一批號的血清。
6,切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,一起血清中的有效成分會破會而影響血清質量。
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原創作者:上海遠慕生物科技有限公司