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試劑盒洗滌
點擊次數:320 發布時間:2017/11/1
洗刷在ELISA試劑盒進程中雖不是一個反響步驟,但卻也決議著試驗的勝敗。ELSIA就是靠
洗刷來到達分離游離的和結合的酶符號物的意圖。通過洗刷以鏟除殘留在板孔中沒能與固
相抗原或抗體結合的物質,以及在反響進程中非特異性地吸附于固相載體的攪擾物質。聚
苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗刷時又應把這種非特異性吸附的攪擾物
質洗刷下來?梢哉f在ELISA操作中,洗刷是*主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重
視,操作者應嚴厲按要求洗刷,不得馬虎。
洗刷的方法除某些ELISA儀器配有特別的主動洗刷儀外,手工操作有浸泡式和流水沖
洗式兩種,進程如下:
。1)浸泡式 a.吸干或甩干孔內反響液;b.用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔
后,即甩去);c.浸泡,即將洗刷液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時刻不可隨
意縮短;d.吸干孔內液體。吸干應完全,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清
潔毛巾或吸水紙上拍干;e.重復操作c和d,洗刷3-4次(或按闡明規則)。在間接法中如本
底較高,可增加洗刷次數或延伸浸泡時刻。
。2)ELISA試劑盒微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯
乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的,非離子型洗刷劑既含疏水基團,也含親水基團,其
疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合,然后削弱蛋白質與固相載體的結合,并借助
于親水基團和水分子的結合作用,使蛋白質回復到水溶液狀況,然后脫離固相載體。洗刷
液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使
包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
。3)流水沖刷式 流水沖刷法*初用于小珠載體的洗刷,ELISA試劑盒洗刷液僅為蒸餾水甚至可用
自來水。洗刷時附接一特別設備,使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗,持續沖刷2分鐘
后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比如
淋浴,其洗刷作用更為完全,且也簡便、快速。已有試驗標明,流水沖刷式相同也適用于
微量滴定板的洗刷。洗刷時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔外表,洗刷作用
更佳。