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              ELISA試劑盒兩大步驟

              點擊次數:135 發布時間:2017/6/12

              試驗有效性判斷;陰性對照:正常情況下,陰性對照孔OD450值≤0.2;陽性對照:正常情況下,陽性對照孔OD450值≥0.4;臨界值(C.O.)核算:臨界值=0.2+陰性對照均值;陰性對照OD450值大于0.2時應放棄,如所有陰性對照OD450值均大于0.2時須重復試驗;陰性對照低于0.05時以0.05核算。

               

              elisa試劑盒操作過程

              病毒性腸炎(DVE),又名瘟(DP)是由病毒性腸炎病毒(DEV)致使的、鵝及多種雁形目禽類的一種急性、熱性、敗血性傳染病。傳達迅速,發病率和死亡率都很高,給中國養禽業形成巨大的經濟損失。在病毒性腸炎的免疫預防工作中,接種了病毒性腸炎疫苗后,因為多種要素也許致使免疫不發生或發生低水平病毒性腸炎病毒抗體。

              B蛋白是病毒的囊膜蛋白,具有吸附、穿入、交融細胞以及細胞間傳達功用,具有杰出的反響原性及免疫原性,誘導機體發生高水平的體液和細胞免疫反響。本試劑盒選用酶聯免疫吸附試驗檢查血清中抗病毒性腸炎病毒gB蛋白抗體IgG。用于免疫病毒性腸炎疫苗后的抗體動態水平監測,輔導免疫預防工作,評價病毒性腸炎免疫情況,也可用于該病的流行病學查詢。

               

              ELISA試劑盒試驗過程

              需求自備的器件;微量移液器,微量移液器配套運用的槍頭,用來稀釋洗滌液的500ml量筒,適用于檢查96T微孔板的酶標儀,用于稀釋樣品的1.5ml Ep管,蒸餾水或去離子水。 樣品的制備;用樣品稀釋液將待檢血清樣品進行100倍稀釋(建議:2μl血清樣品參加198μl樣品稀釋液中),樣品參加包被板前要充沛混勻,稀釋不一樣待檢樣品留意更換槍頭。留意:①制備血清用的血液樣本應無溶血景象發生;②不能稀釋陰性、陽性對照。

              操作過程;在A1和A2孔平分別參加100μl陰性對照;在A3和A4孔平分別參加100μl陽性對照;取100μl經1:100稀釋好的待檢樣品參加相應孔中,并做好記載;37℃孵育1h;將各孔的液體棄入廢液桶,每孔加250μl的洗滌液(試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可運用。如有結晶,需先溶解后,方可進行稀釋)進行洗板,重復5次,每次30s;加液時避免各孔間洗滌液串流影響檢查成果,盡量將孔內洗滌液拋甩潔凈;每孔加100μl酶標聯系物;37℃孵育1h;重復過程3.5;每孔加100μl底物液;37℃孵育10min(避光顯色);每孔加100μl的終止液;立刻于450nm波利益測定各孔的吸光度值,即OD450值。

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