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ELISA試劑盒實驗中各種問題的解決方案
點擊次數:202 發布時間:2017/1/18
ELISA試劑盒試驗中常會遇到這些疑問:
1. 溫育條件不一致,恒溫箱溫育較水浴顯色深,OD值高出0.1-0.15,均選用恒溫箱。如用水浴水溫應控制在37℃。
2. 樣品數量不一,加樣時間長短不一。當重復某一樣品時,加樣時間盡可能與初次挨近。
考慮到有些客戶沒有試驗設備,我公司還可以供應代測效力,只需付試劑盒的費用,代測是免費的哦!
間接法 :此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
雙抗體夾心法 :被查看的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。
ELISA試劑盒另一個則是查看抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。
這兩種抗體有必要留神選擇,才可防止交互反應或比賽一樣的抗原聯絡部位。
比賽法:樣本里的抗原(清閑抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一起比賽一樣的抗體,當樣品里的清閑抗原越多,就可以聯絡越多的抗體,而固定抗原就只能聯絡到較少的抗體,反之亦然。
經清潔進程,洗去清閑抗原和抗體的復合物,只留下固定抗原和抗體的復合物,拿來與只需固定抗原的對照組作用相比較,依據呈色區別就可計算出樣品里的抗原含量。
ELISA試劑盒直接法 :將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。