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技術文章
淺在ELISA試劑盒的保溫工作
點擊次數:157 發布時間:2017/7/4 9:43:54
在elisa試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響,即加標本和加試劑盒系物后?乖贵w反響的完結需求有必定的溫度和時刻,這一保溫進程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當。
ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的聯系只在固相表面上發作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標本,其間的抗原并不是都有均等的和固相抗結 合的時機,只需*靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐漸平衡的進程,因而需經擴散才干到達反響的結尾。在這以后參加的酶符號抗體與固相抗 原的聯系也相同如此。這即是為什么ELISA反響老是需求必定時刻的溫育。溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體聯系的合適溫度。在樹立ELISA辦法作反響 動力學研討時,實驗表明,兩次抗原抗體反響通常在37℃經1~2小時,產品的生成可達頂峰。為加快反響,可進步反響的溫度,有些實驗在43℃進行,但不宜 選用更高的溫度?乖贵w反響4℃更為徹底,在放射免疫測定中多使反響在冰箱中,以構成*多的沉積。但因所需時刻太長,在ELISA試劑盒中通常不予 選用。
保溫的辦法除有的 ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外,通常均選用水浴,可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度敏捷平 衡。為避免蒸騰,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA試劑盒應放在濕盒內,濕盒要選用傳 熱性良好的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,*后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規則的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。 無論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響,操作時的室溫應嚴厲約束在規則的范圍內,規范室溫溫度是指 20~25℃,但具體操作時可根據說明書的請求操控溫育。室溫溫育時,ELISA試劑盒只需平置于操作臺上即可。應留意溫育的溫度和時刻應按規則力求準 確。為確保這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。
ELISA試劑盒開發平臺,成熟的抗原、抗體研制體系,熟練掌握各種酶聯技能,如雙抗夾心法、(直接)競爭法、間接競爭法、阻斷法、間接法、雙抗原夾心法等辦法,聯系我公司的確診試劑開發團隊咱們可以有用的將試劑盒開發為臨床確診級別,質量處于世界前列。
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