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影響細胞轉染試驗的因素有哪些？
點擊次數：314 發布時間：2017/6/2
轉染，是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，細胞轉染目前已面為實驗室工作中經常涉及的基本方法。細胞轉染的途徑大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類。物理介導：電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例�；瘜W介導：方法很多，如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術。生物介導：方法有較為原始的原生質體轉染，和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。理想的細胞轉染方法，應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。病毒介導的轉染技術，是目前轉染效率的方法，同時具有細胞毒性很低的優勢。但是，病毒轉染方法的準備程序復雜，常常對細胞類型有很強的選擇性，在一般實驗室中很難普及。其它物理和化學介導的轉染方法，則各有其特點。
無論采用哪種轉染技術，要獲得*優的轉染結果，可能都需要對轉染條件進行優化。影響轉染效率的因素很多，從細胞類型、細胞培養條件和細胞生長狀態，到轉染方法的操作細節，都需要考慮。愛測智能科技總結出影響轉染試驗的因素主要有以下幾個：
1.轉染試劑
不同細胞系轉染效率通常不同，但細胞系的選擇通常是根據實驗的需要，因此在轉染實驗前應根據實驗要求和細胞特性選擇適合的轉染試劑。每種轉染試劑都會提供一些已經成功轉染的細胞株列表和文獻，通過這些資料可選擇*適合實驗設計的轉染試劑。
2.細胞狀態
一般低的細胞代數
3.轉染方法
不同轉染試劑有不同的轉染方法，但大多大同小異。轉染時應根據具體轉染試劑推薦的方法，但也要注意，因不同實驗室培養的細胞性質不同，質粒定量差異，操作手法上的差異等，其轉染效果可能不同，應根據實驗室的具體條件來確定*佳轉染條件。
4.載體構建
轉染載體的構建（病毒載體，質粒DNA,RNA,PCR產物，核苷酸等）也影響轉染結果。病毒載體對特定宿主細胞感染效率較高，但不同病毒載體有其特定的宿主，有的還要求特定的細胞周期，如逆轉錄病毒侵染分裂期的宿主細胞，此外還需考慮一些安全問題（如基因污染）。除載體構建外，載體的形態及大小對轉染效率也有不同的影響，如前面提到的超螺旋及線性DNA對瞬時和穩定轉染的影響。如果基因產物對細胞有毒性作用，轉染也很難進行，因此選擇組成或可調控，強度合適的啟動子也很重要，同時做空載體及其它基因的相同載體構建的轉染正對照可排除毒性影響的干擾。
