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              艾美捷CompTech丨人補體C3蛋白功能和測定

              點擊次數:0發布時間:2023/3/3 16:09:20

              艾美捷CompTech丨人補體C3蛋白功能和測定

              更新日期:2023/3/3 16:09:20

              所 在 地:中國大陸

              產品型號:

              簡單介紹:人類天然的C3是一種天然的糖基化 (~2.7%) 多肽,包含兩條二硫鍵連接的鏈 。C3是補體激活的所有三種途徑的激活的核心(Law,S。K.A.和里德,K。

              相關標簽:CompTech 

              優質供應

              詳細內容

               艾美捷CompTech人補體C3蛋白:

               

              名稱: C3蛋白

              編號: A113

              規格: 250 µg/vial

              濃度: 1.0 mg/mL (實際濃度見分析證書)

              類型 冷凍液體

              活動: >值為70%,與正常人血清標準相比 (見分析證書) 。

              純度: >95%由SDS-PAGE

              緩沖區: 10 mM磷酸鈉,145 mM氯化鈉,pH 7.2

              消缺系數。 A280 nm在1.0 mg/mL時的=為1.03

              分子量: 185000Da (2鏈)

              防腐劑: 無,0.22µm過濾

              存儲: - 7 0oC或以下。避免凍融 (>每次解凍活性損失10%) 。

              根源 正常的人類血清 (經認證的HBsAg、HTLV-I/II、STS和HCV、 HIV1和HIV-II抗體檢測均為陰性) 。

              預防措施 在處理人體血液制品時要采取常規的預防措施。

               

              般說明

              人類然的C3是一種天然的糖基化 (~2.7%) 多肽,包含兩條二硫鍵連接的鏈 。C3是補體激活的所有三種途徑的激活的核心(Law,S。K.A.和里德,K。

              B. M. (1995)).每個途徑的起始都產生與目標表面結合的蛋白水解酶復合物 (C3轉化酶 ) 。這些酶在C3中切割一個肽鍵,釋放過敏性毒素C3a并激活C3b。在很短的一段時  (~60µs) ,這種新生的C3b能夠與目標表面的羥基發生反應并共價偶聯。碳水化合 是選的目標,但蛋白質的羥基和氨基也會發生反應。這種用C3b標記目標表面的過 程被為調理作用。新生C3b的反應位點是硫酯(Tack B。J.等人。 (1980); Pangburn M.K.和穆勒-EberhardH。J. (1980) ),C3b通過共價酯鍵與目標相連 (如果C3b附著 氨基,則形成酰胺鍵) 。大多數在補體激活過程中被激活的C3永遠不會附著在表面 ,因它的硫酯與形成水的流體相C3b反應,而C3bH和形成iC3b的因子迅速失活。表 面結合的C3b在所有三個途徑中對于有效激活C5和C5b-9復合物的形成都是必需的。 合的C3b及其分解產物iC3bC3d被淋巴細胞和吞噬細胞上的許多受體識別,這些 體使用C3b配體刺激抗原呈遞給適應性免疫系統的細胞。終的結果是目標特異性胞和t細胞群體的擴大。

               

              物理特性和結構

              分子量18.5萬道爾頓, 由兩條二硫鍵連接的鏈組成。阿爾法鏈是110000道爾 頓 (包含C3aC3d域) ,測試鏈是75000道爾頓。阿爾法鏈和阿爾法鏈是通過一個二 連接起來的。C3的pI約為。5.9

              C3C3轉化酶切割后,C3a (77個氨基酸片段,9083 Da) 從alpha鏈的n端釋 出來,C3b (176,000 Da) 變成


              共價附著在活化劑表面的。C3和C3b的晶體衍生結構均已被描述(Gros,P。  (2008) ) ,這些結果表明,在C3aC3b肽鍵被裂解后,C3的C3b部分發生了很大的構象變化。

              天然的C3和C4在血漿中循環,通過分子內硫酯鍵連接其C3dC4d結構域中  甘氨酸谷氨酰胺殘基。這些硫酯鍵容易受到氨、 甲胺、羥胺和聯胺等氨的親零攻擊 ,所有這些胺都已被用于滅活補體

              血清

              CAS號:80295-41-6

              MDL號 :  MFCD00130836

              C3對于有效的補體激活和隨后的抗原呈現給適應性免疫系統的細胞至關重  (Lambris,J。D. (1988)).在識別目標補體后,被三種補體途徑中的一種激活,并在 表面形成酶 (C3轉化酶) 。這些酶 (C4b、C2aC3b、Bb) 在阿爾法鏈的Arg 77后 C3,釋放過敏性毒素C3a并將C3b沉積在目標表面。雖然有一個非常弱的C3旁路系 統通過典和凝集素途徑運作 (C4b,C2a可以在沒有C3b的情況下激活C3b的102000)  ,C3b是有效C5激活所必需的(Rawal N。和潘伯恩M。K. (2003)).

              純化的c3對凍融為敏感,在每個凍融循環中損失510%的活性。它對諸如-20 等中間溫度也很敏感oC.它在中等溫度下停留的時間越長,失去的活性就越多。幾 oC可以完全滅活它,即使它仍然被完全凍結。

              測定

              補體活需要c3。因此,典型的C3功能檢測在缺乏C3的系統中使用細胞裂解端 點,了來自被檢測的來源。有三種基本的檢測方法。1)抗體致敏的綿羊紅細胞 (EA ) 可用于使用c3耗盡的人血清的ch50型檢測。該方法的靈敏度約為50 ng C3。2) EA 和純的成分C1、C4和C2可用于制造EAC142細胞,利用C3進行有效的C5激活和裂解  (Dodds,A。W.和Sim,R。B. (1997)).該方法的靈敏度約為5 ng C3。3)另一種途徑 方法可在5 mM MgEGTA存在下使用兔紅細胞和c3耗盡的人血清。該方法的靈敏度 為200 ng C3。

              HBsAg、HTLV-I/II、STS以及HCV、HIV1和HIV-II抗體的認證檢測均為陰性。

              參考文獻

              Dodds, A.W. and Sim, R.B. editors (1997) Complement. A Practical Approach (ISBN

              019963539) Oxford University Press, Oxford.

              Ghannam A, et al. (2008) Human C3 deficiency associated with impairments in dendritic cell differentiation, memory B cells, and regulatory T cells. J Immunol. 1;181(7):5158-

              66.

               

              來源:https://www.amyjet.com/products/A113.shtml

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