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該活化蛋白-1(AP-1)測定試劑盒是一種全功能螢火蟲熒光素酶報告物測定系統。除了AP-1報告細胞外,該試劑盒還提供了兩種用于細胞培養和稀釋測試樣品的優化培養基,即參考AP-1活化劑Phorbol 12肉豆蔻酸13乙酸酯(PMA)、熒光素酶檢測試劑、細胞培養就緒測定板和詳細方案。
INDIGO的報告細胞含有一個與串聯TPA反應元件(TRE)序列功能性連接的工程熒光素酶報告基因,該序列位于小啟動子的上游;罨AP-1與其TRE結合以驅動Luc基因表達。因此,量化處理的報告細胞中熒光素酶活性的變化提供了AP-1活性變化的敏感替代測量。因此,該報告測定法的主要應用是篩選受試化合物,以量化它們可能對AP-1產生的任何激活或抑制功能活性。
報告細胞使用INDIGO的有CryoMite制備™ 過程這種冷凍保存方法在解凍后產生高細胞活力,并提供了將健康報告細胞立即分配到測定板中的便利。不需要中間準備步驟,如細胞的旋轉和沖洗、活力測定或測定設置的細胞滴度調整。
INDIGO的Reporter Assays是全方位的基于細胞的檢測系統。除了AP-1報告細胞外,該試劑盒還提供了兩種用于細胞培養和稀釋測試樣品的優化培養基,即參考AP-1活化劑Phorbol 12肉豆蔻酸13乙酸酯(PMA)、熒光素酶檢測試劑和細胞培養就緒測定板。
Cayman Chemical 艾美捷人活化蛋白-1報告物測定系統特點:
1、篩選測試樣本,以量化其可能對人類AP-1產生的激活或抑制功能活性
2、穩健的技術為一致和可重復的數據采集提供持續的響應
3、試劑盒中包括:即用、預轉染的報告細胞|優化的培養基|參考活化劑|熒光素酶檢測試劑|細胞培養物檢測板
Cayman Chemical 人活化蛋白-1報告物測定系統化驗方案:
INDIGO的檢測試劑盒利用了低的背景、高靈敏度和生物發光報告基因技術的寬線性動態范圍。報告細胞包含編碼甲蟲熒光素酶的cDNA,這是一種源自62kD的蛋白質來自北美螢火蟲(Photinus pyralis)。熒光素酶在Mg+2依賴性反應中催化D-熒光素的單氧化,該反應消耗O2和ATP作為共底物,并產生氧熒光素、AMP、PPi、CO2和光子發射的產物。
使用光度計定量反應的發光強度,并在相對光單位(RLU)的術語。INDIGO的檢測試劑盒具有門配制的熒光素酶檢測試劑在啟動熒光素酶反應后5至90+分鐘之間穩定發光。結合至少5分鐘的反應休息期,確保發光曲線從而允許批量處理測定板。通過做因此,從一個板到下一個板的所有樣品孔的信號輸出可以直接在實驗組內進行比較。
Cayman Chemical 人活化蛋白-1報告物測定系統文獻參考:
1、 Bejjani F et. al., 2019, Biochim Biophys Acta Rev Cancer; 1872(1):11-23.
doi:10.1016/j.bbcan.2019.04.003. Epub 2019 Apr 26. PMID: 31034924 Review
2、 Lee W, Mitchell P, Tjian R., 1987, Cell, 49(6): 741-752.
doi: 10.1016/0092-8674(87)90612-x. PMID:3034433.
3、 Shaulian E and Karin M., 2002, Nature Cell Biology; 4(5):E131-6.
doi:10.1038/ncb0502-e131. PMID: 11988758 Review
Cayman Chemical涉及癌癥、腫瘤、氧化損傷、凋亡、氧化性損傷、代謝、內分泌學等多種研究域。艾美捷科技是Cayman Chemical的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
來源:https://www.amyjet.com/brand/cayman-china-distributor.shtml