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Nanoprobes 艾美捷用于免疫組織化學和印跡的EnzMetTM
點擊次數:0發布時間:2022/10/27 17:02:51
更新日期:2022/10/27 17:02:51
所 在 地:中國大陸
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如果你想親自嘗試這種應用,Nanoprobes 艾美捷 EnzMetTM HRP檢測試劑盒可用于研究應用。
Nanoprobes艾美捷 EnzMetTM HRP檢測試劑盒參考文獻:
Schüler T, Asmus T, Fritzsche W, Möller R.: 絲網印刷是檢測病毒DNA的帶電讀數的DNA芯片的成本效率制造方法。Biosens. Bioelectr., 24, 2077-2084 (2009).
摘要(由Science Direct提供)。
EnzMetTM也是免疫組化(IHC)的理想檢測和可視化方法,它可用于高度敏感的檢測,背景小,在印跡上的對比度非常高。使用高復雜度組織微陣列(TMA)測試了免疫組化的應用。使用自動玻片染色系統(Ventana Medical Systems),通過酶金屬學(EnzMet)對88種常見的實體瘤進行了評估;選擇目標是為了評估EnzMet在TMAs中特異性定位核(雌激素受體)、細胞質(細胞角蛋白)和細胞質膜(HER2)的編碼抗原的能力。對于乳腺腫瘤以及腎臟、結腸和列腺的癌腫,所評估的所有三種抗原的染色強度是相當的。然而,與DAB相比,EnzMet IHC制備的染色質量更清晰,染色沉積物更明確,顯示出更多的點狀外觀。EnzMet和傳統IHC的結果完全一致。EnzMet反應產物密集而清晰,沒有明顯的擴散,并為評估的核、細胞質和細胞膜定位抗原在石蠟切片中提供了出色的高分辨率的細胞區段區分。酶金相術中沉積的元素銀密度較高,允許在相對較低的放大率下評估核心免疫表型,不需要浸油,可以有效地篩選更多的組織。此外,信號是穩定的,可以提供永久的記錄。
參考文獻。
Tubbs R.; Pettay J.; Powell R.; Hicks D. G.; Roche P.; Powell W.; Grogan T., and Hainfeld, J. F.: 通過酶金屬學對組織微陣列中的亞細胞區進行高分辨率的免疫分型。Appl. Immunohistochem. Mol. Morphol., 13, 371-375 (2005).
摘要(由PubMed(Medline)提供)。
對于免疫組化,使用Nanoprobes EnzMet EnzMet HRP Detection Kit for IHC/ISH(目錄號6001)。
左圖:石蠟包埋的人膀胱腫瘤中上皮細胞角蛋白的免疫過氧化物酶染色。
(a)用DAB進行二次免疫過氧化;(b)用EnzMetTM進行二次免疫過氧化方法(原始放大倍數為400)。
右圖。使用(c)DAB和(d)EnzMetTM開發的HRP結合物對his標記的融合蛋白進行Western blot檢測的比較。
轉移后,將膜與抗His-Tag(6xHis)單克隆抗體孵化,然后用BSA阻斷,然后暴露于辣根過氧化物酶(HRP)結合的第二抗體。然后通過DAB檢測(面板A)或EnzMetTM檢測(面板B)對His標記的融合蛋白進行可視化。泳道1和4:0.1 µg的34 kDa his-tagged ATF-1。泳道2和5:0.1 µg 68 kDa his-tagged YY1。泳道3和6:0.1微克BSA和0.1微克卵清蛋白。
在大多數情況下,使用Nanoprobes EnzMetTM印跡方案可以替代傳統的DAB顯影,而無需進一步修改方案。然而,由于其更高的靈敏度,為了達到靈敏度和清晰度的J佳組合,可能需要更大的一抗體或二探針稀釋度。在免疫組織化學實驗中,五倍到十倍的額外稀釋已經被發現可以獲得良好的結果,在這里也可能是合適的。
Nanoprobes 艾美捷 EnzMetTM印跡方案參考文獻:
Liu, W.; Mitra, D.; Powell, R.; Tubbs, R.; Pettay, J., and Hainfeld, J.: Enzyme Metallography Silver Deposition for HRP Detection. Presented at ASCB 2007, Washington DC, December 1-4, 2007,: Poster # B349, Presentation # 1209.
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