NINDS的Susan Cheng博士和合作者已經改進了他們的包埋程序，使用Nanogold®-Fab＇和HQ銀進行J均勻、一致和可靠的包埋標記。

用戶在使用該方案時發現了：

與其他方法相比，金標記的密度更高。

非常高的特異性。

J大的分辨率。

Tanner和他的同事已經描述了這個程序，據報道，與其他方法相比，這個程序可以得到明顯更高密度的銀增強的金納米粒子。下面是一個結果的例子。

圖：Nanogold®:-Fab＇山羊抗兔IgG（目錄#2004）標記大鼠大腦中的K+通道Kv2.1亞基，然后用HQ銀（目錄#2012）增強。注意免疫染色的高密度和特異性，甚至闡明了亞單位定位在細胞膜的細胞質側和高爾基體的外堆；軸突和終端明顯是陰性的。由J.Du, J.-H. Tao-Cheng, P.Zer.完成的工作。Tao-Cheng, P. Zerfas, ａnd C. J. McBain, NIH完成。見神經科學，84，37-48（1998）Bar 1微米。

Nanoprobes艾美捷DPPE-NANOGOLD材料和試劑：

磷酸鈉緩沖液。0.1M磷酸鈉，pH值調整為7.4。

磷酸鹽緩沖液（PBS）緩沖液。0.02M磷酸鈉緩沖液與0.15M氯化鈉，pH值調整為7.4。

磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）緩沖液。0.02M磷酸鈉緩沖液加0.15M氯化鈉，pH值調至7.4，含(a)5%牛血清白蛋白和0.05至0.1%疊氮鈉；和(b)1%山羊血清和0.1%NaN3，3-4 X 5 min

戊二醛和多聚甲醛。

HQ銀試劑（Nanoprobes）。

去離子水或蒸餾水。

Nanoprobes艾美捷DPPE-NANOGOLD協議：

用以下方法固定約45分鐘（對于單層培養物）。(1) 在0.1M磷酸鈉緩沖液中的4%多聚甲醛，pH7.4，或(2) 在0.1M磷酸鈉緩沖液中的2%多聚甲醛與0.05% - 0.1%戊二醛，pH7.4。

用0.1M磷酸鈉緩沖液，pH7.4清洗，3次，每次5分鐘。

用含5%山羊血清、0.1%疊氮鈉和0.1%皂素的PBS阻斷和通透細胞1小時。

用含有5%正常山羊血清、0.1%皂素和0.1%疊氮鈉的PBS制成的抗體在室溫下孵育1小時。

用含1%山羊血清和0.1%疊氮鈉的PBS洗3-4 x 5分鐘。

在1毫升含有1%山羊血清和0.1%疊氮鈉的PBS中，用Nanogold標記的Fab＇抗兔或小鼠（取決于一抗體）二抗體結合物（4升）孵育1小時，室溫下。

用含有1%山羊血清和0.1%疊氮鈉的PBS清洗，一次，然后用PBS清洗，兩次。

用PBS中的2%戊二醛固定30分鐘。

用PBS洗3次。儲存過夜。

第二天用水徹底清洗。

進行銀增強（HQ銀增強試劑盒，Nanoprobes, NY）。

用水清洗。在LM下仔細檢查；只對有希望的標本進行EM處理。

在0.1M磷酸鹽緩沖液中清洗，pH7.4。

在0.1M磷酸鹽緩沖液中加入0.2%的OsO4，30分鐘。

清洗，用乙酸鈾染色，在乙醇中脫水，然后嵌入。

Nanoprobes特色熒光納米金探針在一個探針中結合了納米金（Nanogold）和熒光素，用于熒光和電鏡兩種技術共同進行樣品成像。艾美捷科技是Nanoprobes的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。

來源：https://www.amyjet.com/merchants/Nanoprobes-n.html