293/Cas9細胞系穩定表達Cas9和嘌呤霉素抗性基因。利用逆轉錄病毒將Cas9和嘌呤霉素抗性基因導入親代293細胞。

Cell Biolabs

Cell Biolabs：細胞學試劑品牌，為生物技術和研究類客戶提供基于細胞功能研究以及疾病等方面的技術和服務。主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等域。

Cell Biolabs / 艾美捷 293/Cas9細胞系表達Cas9蛋白。293個細胞或293/Cas9細胞用酶裂解RIPA緩沖液，并使用Cell Biolab的Cas9 ELISA試劑盒（Cat#PRB-5079）檢測Cas9蛋白水平（見下圖）。

Cell Biolabs 293/Cas9細胞，通過形態學測定，臺盼藍染料排除，活細胞計數。293/Cas9細胞已經過測試，沒有微生物污染。

1.培養基：DMEM（高糖），10%胎牛血清（FBS），0.1 mM MEM非必需氨基酸（NEAA），2 mM L-谷氨酰胺，1%Pen-Strep，（可選）1-2µg/mL嘌呤霉素。

2.冷凍培養基：70%DMEM、20%FBS、10%DMSO。

從冷凍細胞建立293/Cas9培養基

1.將10毫升完整的DMEM生長培養基置于50毫升錐形管中。解凍冰凍的食物在37°C水浴中輕輕攪拌，在1-2分鐘內將細胞冷凍。凈化空氣用70%（v/v）乙醇擦拭冷凍瓶表面。

2.將解凍的細胞懸浮液轉移到含有10mL生長培養基的錐形管中。

3.在室溫下，以1000 rpm的轉速離心5分鐘，收集細胞。移除通過抽吸生長培養基。

4.通過輕輕移液，將細胞重新懸浮在錐形管中的15ml新鮮生長培養基中然后下來。

5.將15 mL細胞懸浮液轉移至T-75組織培養瓶中。將電池置于37°C的溫度下培養箱中的二氧化碳濃度為5%。

6.每天監測細胞密度。細胞應在培養物達到95%匯合時傳代。

Cell Biolabs 相關試劑盒研究方案：

1.CBA-100：細胞選擇™ 24孔細胞遷移試驗（8µm，比色法）

2.CBA-106：細胞選擇™ 96孔細胞遷移分析（8µm，熒光法）

3.CBA-120：細胞選擇™ 24孔傷口愈合試驗（顯微鏡）

4.CBA-125：半徑™ 24孔細胞遷移分析（顯微鏡）

5.CBA-126：半徑™ 96孔細胞遷移分析（顯微鏡）