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              Cytoskeleton丨GEF活性檢測試劑盒詳情解析

              點擊次數:0發布時間:2021/11/24 17:27:49

              Cytoskeleton丨GEF活性檢測試劑盒詳情解析

              更新日期:2021/11/24 17:27:49

              所 在 地:中國大陸

              產品型號:

              簡單介紹:Cytoskeleton 丨GEF活性檢測試劑盒,是款基于熒光法的檢測GTP酶上的核苷酸轉換的試劑盒,可適用于常規的96孔格式或高通量384孔格式。

              相關標簽:Cytoskeleton SPY650-FastAct 

              優質供應

              詳細內容

               G蛋白的共同特點是,當結合了GTP時即成為活化形式,這時可作用于下游分子使之活化,而當GTP水解成為GDP時(自身為GTP酶)則恢復到非活化狀態(分子開關),正常情況下,在細胞中,小G蛋白會在跟GDP結合的“關閉狀態”和 GTP 結合的“開啟狀態”之間循環,這種循環過程主要由細胞內的小G蛋白調節因子來控制,胞內小G蛋白調節因子主要有兩類:類是可以增強小G蛋白的活性的鳥苷酸交換因子(guanine nucleotide exchange factor, GEF),另類是可以降低小G蛋白活性的GTP酶活化蛋白(GTPase activating protein, GAP)。

               

              接下來就主要來聊聊小G蛋白活性增強劑——鳥苷酸交換因子(GEF),GEF 是通過催化其目標 GTPase上的核苷酸交換來發揮作用,GEF與核苷酸結合的 GTPase 結合,這會導致結合的核苷酸被釋放,從而產生不含核苷酸的GEF-GTPase 反應中間體。這種不含核苷酸的復合物隨后將結合新的核苷酸,然后GEF再從GTPase 中釋放出來。

               

              由于GEFs對GDP-GTPases的親和力高于對相應GTP-GTPases的親和力,在正常細胞中GTPGDP比率約為10:1,GEFs將推動從GDP-GTPasesGTP-GTPases的轉換。

               

              艾美捷 Cytoskeleton GEF活性檢測試劑盒,是款基于熒光法的檢測GTP酶上的核苷酸轉換的試劑盒,可適用于常規的96孔格式或高通量384孔格式。

               

              Cytoskeleton丨GEF活性檢測試劑盒組成部分:

               

              1.Exchange Buffer

              2.His標簽 Cdc42蛋白

              3.His標簽 Rac1 蛋白

              4.His標簽 RhoA 蛋白

              5.His標簽 hDbs 蛋白(作為 Cdc42 和 RhoA GEF的陽性對照 )

              6.黑色384孔板

              7.黑色96孔板

               

              艾美捷 Cytoskeleton丨GEF活性檢測試劑盒檢測原理:

              通過檢測熒光核苷酸類似物 N-甲基鄰氨基苯甲酰-GTPmant-GTP)對 GTPase 的結合情況來檢測GEF的活性的。旦mant-GTP與 GTPase 結合, mant-GTP的熒光強度(Ex360 nm,Em440 nm)顯著增加,通過檢測游離的mant-GTPGTPase 結合的 mant-GTP 之間的熒光值差異,即可檢測樣本中GEF的活性。

               

              艾美捷 Cytoskeleton丨GEF活性檢測試劑盒的主要用途和應用:

               

              測定未知GEFs活性;

              小GTPases及其相關GEFs的生化特性表征;

              研究不同輔助因子或蛋白結構域對GEF活性的調控;

              篩選GEFs或GTPases突變蛋白的活性和底物特異性;

              HTS(高通量篩選)篩選鑒定GEF抑制劑。

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