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              Cell Counting Kit-8(CCK-8)細胞增殖檢測試劑盒如何選擇

              點擊次數:331 發布時間:2017/2/23 11:54:29
               Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),適用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

              CCK8-Figure

              Figure.1 CCK-8(WST-8)反應機制

              實驗原理:

              WST-8屬于MTT的升級產品,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物(formazan)。顏色的深淺與細胞的增殖成正比,與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值,間接反映活細胞數量。

              用途:

              CCK-8法應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增  殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。

               

              為什么將Cell Counting Kit (CCK-8) 作為細胞增殖與毒性檢測*佳選擇:

              • 如下表,CCK-8法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優勢比較,結果不言而喻!

               

              檢測方法 MTT法 XTT法 WST-1法 CCK-8法
              甲臜產物的水溶性 差(需加有機溶劑溶解后再檢測)
              產品性狀 粉末 2瓶溶液 溶液 1瓶溶液
              使用方法 配成溶液后使用 現配現用 即開即用 即開即用
              檢測靈敏度 很高 很高
              檢測時間 較長 較短 較短 *短
              檢測波長 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
              細胞毒性 高,細胞形態完全消失 很低,細胞形態不變 很低,細胞形態不變 很低,細胞形態不變
              試劑穩定性 一般 較差 一般 很好
              批量樣品檢測 可以 非常適合 非常適合 非常適合
              便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷

              * 細胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀數從而找到*佳測定時間

              * 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾(扣除空白孔即可)

               

              如何選擇合適的CCK-8檢測試劑盒?

              目前市面上能提供的【CCK-8】細胞增殖/毒性檢測試劑盒有國產分裝或原產的,國產分裝的CCK-8試劑盒在質量穩定性上有不足。而原產于國內實驗室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測結果,在批次之間的穩定性上較難控制。至于原裝進口供應CCK-8試劑盒的進口品牌并不多,就連Abcam、Thermo,Sigma等等幾個品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒,而其它品牌在性價比上遠遜于Abbkine產品。

               

              作為Abbkine品牌旗下首款細胞分析旗艦產品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研發工程師為其傾注了大量的投入,不斷摸索優化*佳的配方,每一份努力只為讓科研工作者更加簡單,高效,穩定地獲取珍貴的科研數據。

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              產品名稱及描述 貨號 產品說明
              Cell Counting Kit-8 (CCK-8) KTC011001 詳情

               

              本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作 。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan?梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。

               

              《【CCK-8】細胞增殖/毒性檢測試劑盒綜合對比》

              品牌(規格) Abbkine Sigma Dojindo
              100次 200 元 703.17 元 350 元
              500次 640 元 2779.92 元 890 元
              2000次 2050 元 13899.6 元(3000次) ——
              10000次 7180 元 —— 8380 元

               

              實驗注意事項:

              • 建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入CCK-8試劑后的培養時間。
              • 有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時,建議斜貼著培養板壁加,不要插到培養基頁面下加,容易產生氣泡,會干擾OD值讀數。
              • 白細胞可能需要培養較長時間。
              • 當使用標準96孔板時,貼壁細胞的*小接種量至少為1,000 個/孔 (100 μL 培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于2,500 個/孔 (100 μL 培養基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗,請先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養基總體積的10%加入CCK-8溶液。
              • 如果沒有450nm的濾光片,可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片,但是450nm濾光片的檢測靈敏度。
              • 如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK-8之前更換新鮮培養基,去掉藥物的影響。當然藥物影響比較小的情況可以不更換培養基,直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。

              更多詳情:請瀏覽下方鏈接

              CCK-8實驗操作指南:http://www.docin.com/p-1853035994.html

              CCK-8常見問題匯總:http://www.docin.com/p-1853035993.html

               

              logo-1Abbkine品牌在2012年成立于美國加利福尼亞州,隨著亞洲市場的迅猛增長,Abbkine將總部搬遷至中國,轉移其生產線和相關技術,由中方資本控股,并整合各方面資源,歷史性地開辟了中國生產基地,立足中國,服務全球。結合了Abbkine美國技術和中國制造兩方面的巨大優勢,致力于提供高品質,買得起的免疫分析試劑、標簽及內參抗體、特色二抗、蛋白質純化產品和其它分子生物學試劑盒,以滿足世界各地的大學科研所、醫院研究以及生物醫學研究機構科學家的研究與分析需求。

              作為Abbkine中國區域總代理,艾美捷將為客戶提供*具性價比的常規免疫學試劑,如各種標簽抗體、內參抗體、常規一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物,蛋白質純化產品以及相關試劑盒等。同時我們作為多家知名品牌的的中國代理或區域代理,艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產品感興趣,請致電免費客戶專線400-6800-868到艾美捷科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案。文章出自:http://www.amyjet.com/featured/cck8-cell-counting-kit.shtml

               

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              原創作者:武漢艾美捷科技有限公司

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